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　　人8异前列腺素(8-iso-PG)Elisa试剂盒使用说明书，本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人8-异前列腺素(8-iso-PG)水平。用纯化的人8-

　　异前列腺素(8-iso-PG)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入8-异

　　酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色，

　　并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的8-异前列腺素(8-iso-PG)呈正相

　　关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线-iso-PG)浓度。

　　1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能

　　2．不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

　　1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀

　　2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、

　　待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，

　　然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽

　　5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 秒后弃去，如此

　　9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色

　　11. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。 测定应在加终止

　　以标准物的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的

　　OD 值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD 值计算出标

　　准曲线的直线回归方程式，将样品的OD 值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，

　　1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未

　　2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

　　3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好

　　4． 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD 值

　　大于标准品孔第一孔的OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计

　　上海市闵行区元江路5500号第1幢5658室联系人：高杰邮编：200443